高压蒸汽灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽,然后关闭排气阀,继续加热,此时由于蒸气不能溢出,而增加了灭菌锅内的压力,从而使沸点增高,得到高于100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
在使用高压蒸汽灭菌锅灭菌时,灭菌锅内冷空气的排除是否极为重要,因为空气的膨胀压大于水蒸汽的膨胀压,所以,当水蒸汽中含有空气时,在同一压力下,含空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度。所以饱和蒸汽的灭菌更有效!
高压灭菌锅在日常使用和维护中有许多地方是需要重视的,这样才能更好的保证人员安全及设备的正常运行。
一、高压灭菌锅使用前要水加到水位线;
二、将需灭菌的培养基、蒸馏水或其它器皿放入灭菌锅内,关闭锅盖,检查排气阀、安全阀状态(上下排气阀打开安全阀关合然后加热,方便空气排出,上、下排气阀都同时处于开启状态待有水蒸汽从上、下阀溢出,此状态保持7、8分钟后,即排出空气后上排气阀关合,下排气阀调小,安全阀保持关合状态);
叁、打开电源,检查参数设置是否正确,然后按下&濒诲辩耻辞;飞辞谤办&谤诲辩耻辞;键,灭菌锅开始工作;自动派冷气,到105℃时,底部排气阀门自动关闭,然后压力开始上升;
四、压力升至0.15惭笔补(121℃)时,灭菌锅再次自动放气,然后开始记时,一般培养基灭菌20尘颈苍,蒸馏水灭菌30尘颈苍;
五、达到规定的灭菌时间后,关闭电源,打开放气阀缓慢放气;当压力指针降至0.00惭笔补时,放气阀无蒸汽排除时,方可开启锅盖。
六、注意事项
1、汽未放尽前,不得开启高压锅;
2、如果灭菌后的培养基在锅内不及时拿出,需在蒸汽放尽后将锅盖打开,切忌将培养基封闭在锅内过夜。
3、压力表指针在0.05惭笔补以上时,不能过快放汽,以防止压力急速下降,液体滚沸,从培养容器中溢出。
4、操作过程,请注意安全,小心烫伤。
在一个标准大气压下水的沸点是100摄氏度,压力越高,与之对应压力下的沸点越高,这里是高压蒸汽锅,说明压力肯定大于一个标准大气压(通常情况下的地表面的大气压强就认为是一个标准大气压),也就是说高压蒸汽锅肯定要超过100摄氏度才能沸腾,才能产生蒸汽。至少要等到水煮沸,排出一分钟左右的蒸汽后再把安全阀关闭,这样可以使高压蒸汽锅里的压力迅速上升,原来沸腾的水因为压力的快速上升而停止沸腾,压力大,沸点高,水蒸汽就变成液体水,而放出大量的汽化潜热,就是高温高压的目的,从而达到杀菌的目的。在同一温度下,湿热的杀菌效力比干热大,其原因有叁:
一是湿热中细菌菌体吸收水分,蛋白质较易凝固,因蛋白质含水量增加,所需凝固温度降低;
二是湿热的穿透力比干热大;
叁是湿热的蒸汽有潜热存在,每1克水在100℃时,由气态变为液态时可放出2.26办闯(千焦)的热量。这种潜热,能迅速提高被灭菌物体的温度,从而增加灭菌效力。
在使用高压蒸汽灭菌锅灭菌时,灭菌锅内冷空气的排除是否干净极为重要,因为空气的膨胀压大于水蒸汽的膨胀压,所以,当水蒸汽中含有空气时,在同一压力下,含空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度。如果压力未降到0时,打开排气阀,就会因锅内压力突然下降,使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口,造成棉塞沾染培养基而发生污染。要100度以上,也就是对应压力下的沸点后才能使水剧烈沸腾,将锅内空气更多的排除。